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          描述質譜鑒定(蛋白鑒定)的技術服務流程

          發布時間:2023-03-05      瀏覽次數:3207
            一、概述:
           
            在細胞內蛋白質磷酸化是一種重要的翻譯后修飾,由特定位點的蛋白質激酶催化把磷酸基團從一個化合物轉移到另一個化合物上的過程。調控著細胞的基本進程,如細胞周期調控、細胞生長和分化等。質譜鑒定蛋白質的磷酸化位點是利用蛋白質經過胰蛋白酶消化后,純化出磷酸化多肽,質譜鑒定出磷酸化位點。
           
            二、技術優勢:與傳統的western鑒定磷酸化相比,通過質譜鑒定蛋白質的磷酸化位點可以定位到氨基酸。
           
            三、技術服務流程:
           
            1、質譜鑒定(蛋白鑒定)樣品的制備:利用磷酸化抗體免疫共沉淀沉淀出磷酸化蛋白質、IMAC純化磷酸化蛋白質、表達和純化磷酸化蛋白質和放射性同位素標記磷酸化蛋白;
           
            2、蛋白質的分離:純化后的磷酸化蛋白質經過凝膠電泳分離后,割取磷酸化蛋白質條帶用胰蛋白酶酶切;
           
            3、質譜鑒定(蛋白鑒定)的鑒定:質譜鑒定磷酸化位點;
           
            4、實驗報告提交。
           
            四、服務內容:
           
            1、質譜鑒定(蛋白鑒定)的分離、純化、割取和酶切;
           
            2、質譜分析;數據庫檢索;
           
            3、提交質譜鑒定(蛋白鑒定)實驗報告。
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